Bradford 法是常用的蛋白濃度檢測的方法,與傳統方法相比,更簡單、更穩(wěn)定、兼容性更好,Bradford法測定蛋白濃度不受絕大部分樣品中的化學物質的影響。樣品中β-巰基乙醇的濃度可高達1M,DTT的濃度可高達5mM,但受高濃度的去垢劑的影響明顯,故在用Bradford Protein Assay Kit進行蛋白定量時,需確保SDS低于0.01%,Triton X-100低于0.05%,Tween 20, 60, 80低于0.015%,含高濃度去污劑的蛋白定量,建議采用BCA Protein Assay Kit。
Leagene 考馬斯亮藍G250染料試劑由考馬斯亮藍G250、乙醇、磷酸等組成,用于考馬斯染料結合(Bradford)分析的總蛋白測量,其特點在于對蛋白樣品中可能存在的大多數鹽、溶劑、緩沖液、硫醇、金屬螯合劑、還原性物質等均不排斥,檢測濃度下限達到25μg/ml,最小檢測蛋白量達到0.5μg,待測樣品體積為1~20μl,在50~1000μg/ml濃度范圍內有較好的線性關系。