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手動(dòng)生化

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羥自由基清除率(檢測(cè)服務(wù))

羥自由基清除率檢測(cè)試劑盒(Fenton微板法)又稱羥自由基清除能力檢測(cè)試劑盒或羥自由基檢測(cè)試劑盒,其檢測(cè)原理是H2O2/Fe2+ 通過(guò)Fenton反應(yīng)產(chǎn)生羥自由基,并將Fe2+氧化為Fe3+,導(dǎo)致紅色的鄰二氮菲-Fe2+氧化為無(wú)色的鄰二氮菲-Fe3+,使鄰二氮菲-Fe2+在536nm處的最大吸收峰消失,可通過(guò)酶標(biāo)儀測(cè)定530~540nm處吸光度的變化,據(jù)此可計(jì)算出羥自由基的含量變化,即可計(jì)算出樣品的羥自由基清除率或清除能力,主要用于植物組織、血清、血漿等樣本。

價(jià)格:¥15.00

規(guī)格:反應(yīng)

貨號(hào):ST1015

品牌:LEAGENE

服務(wù)介紹:

羥自由基清除率檢測(cè)試劑盒(Fenton微板法)又稱羥自由基清除能力檢測(cè)試劑盒或羥自由基檢測(cè)試劑盒,其檢測(cè)原理是H2O2/Fe2+ 通過(guò)Fenton反應(yīng)產(chǎn)生羥自由基,并將Fe2+氧化為Fe3+,導(dǎo)致紅色的鄰二氮菲-Fe2+氧化為無(wú)色的鄰二氮菲-Fe3+,使鄰二氮菲-Fe2+在536nm處的最大吸收峰消失,可通過(guò)酶標(biāo)儀測(cè)定530~540nm處吸光度的變化,據(jù)此可計(jì)算出羥自由基的含量變化,即可計(jì)算出樣品的羥自由基清除率或清除能力,主要用于植物組織、血清、血漿等樣本。

貨號(hào)

名稱

規(guī)格

價(jià)格

ST1015

羥自由基清除率檢測(cè)試劑盒

反應(yīng)

15

實(shí)驗(yàn)流程:

1、準(zhǔn)備樣品:

植物樣品:取正?;蚰婢诚碌男迈r植物組織,清洗干凈,擦干,切碎,迅速稱取,按1~1.5g樣品:4.5ml 蒸餾水的比例勻漿或研磨,室溫靜置4h,離心取上清

血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規(guī)方法制備后可用于該試劑盒的測(cè)定

高活性樣品:如果樣品中含有較高濃度的羥自由基,可用蒸餾水進(jìn)行恰當(dāng)?shù)南♂尅?/span>

2、?OH加樣:按照下表設(shè)置空白管、未損傷管、損傷管、對(duì)照管、測(cè)定管,溶液應(yīng)按照順序依次加入,然后,置各管于37℃水浴鍋保溫1h;如果樣品中的羥自由基(?OH)濃度過(guò)高,可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測(cè)定,樣品的檢測(cè)最好能設(shè)置平行管。

加入物(單位:ml)

空白管

未損傷管

損傷管

對(duì)照管

測(cè)定管

鄰二氮菲溶液

--

0.15

0.15

--

0.15

OH   Assay Buffer

0.2

0.2

0.2

0.2

0.2

亞鐵顯色液

--

0.1

0.1

--

0.1

蒸餾水

0.8

0.55

0.45

0.7

0.35

待測(cè)樣品

--

--

--

0.1

0.1

氧化劑

--

--

0.1

--

0.1

?OH測(cè)定:取96孔板,將各管溶液依次吸取250ul加至96孔板中,用酶標(biāo)儀檢測(cè)530~540nm處各孔吸光度值,依次記為A0、A1、A2、A3`、A3。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果:

全自動(dòng)生化儀檢測(cè)后導(dǎo)出結(jié)果,結(jié)果由EXCEL形式發(fā)送。

送樣運(yùn)輸要求:

1、動(dòng)植物組織樣本(干冰運(yùn)輸)

準(zhǔn)確稱取動(dòng)物組織重量按重量(mg):體積(ul)=1:9的比例加入9倍體積的勻漿介質(zhì)(推薦0.86%或0.9%的生理鹽水),冰水浴條件下,機(jī)械勻漿,制備成10%的勻漿液,2500~3000轉(zhuǎn)/分鐘,離心10分鐘,取上清液進(jìn)行測(cè)定。

2、血清樣本(干冰運(yùn)輸)

全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)夜(GLU檢測(cè)請(qǐng)勿全血樣本放置過(guò)夜取血清)后于2-8℃ 3000轉(zhuǎn)/分離心15min,取上清即可立即檢測(cè);或進(jìn)行分裝,并將標(biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。解凍后的樣本應(yīng)再次離心,然后檢測(cè)。

3、血漿樣本(干冰運(yùn)輸)

可用肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2-8℃3000轉(zhuǎn)/分離心15min,取上清即可立即檢測(cè);或進(jìn)行分裝,并將標(biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。解凍后的樣本應(yīng)再次離心,然后檢測(cè)。

4、細(xì)胞樣本

貼壁細(xì)胞:將細(xì)胞用PBS沖洗2次后,用細(xì)胞刮將細(xì)胞小心刮下來(lái),將培養(yǎng)液3000轉(zhuǎn)/分,離心10min。棄上清留細(xì)胞沉淀,干冰運(yùn)輸。

懸浮細(xì)胞:將培養(yǎng)液3000轉(zhuǎn)/分,離心10min。棄上清留細(xì)胞沉淀,干冰運(yùn)輸。

細(xì)胞上清:標(biāo)本于2-8℃,3000轉(zhuǎn)/分離心15min取上清,上清立即用于實(shí)驗(yàn),或分裝后于-20℃或-80℃保存。避免反復(fù)凍融。

僅供科研用途,不可用于臨床診斷!